Cdna合成最常用的引物是什麼

在cDNA合成過程中,最常用的引物是一對 oligo(dT) 引物和隨機六聚體引物。

  1. oligo(dT) 引物:這種引物是一系列聚胸腺嘧啶核苷酸的集合,它能夠結合mRNA分子上 poly(A) 尾巴。通過使用逆轉錄酶,可以從poly(A) 尾巴開始合成與 mRNA 互補的cDNA。

  2. 隨機六聚體引物:這些是隨機序列的短合成DNA鏈,可以隨機 anneal(雜交)到 mRNA 分子的各種位置。這樣可以確保即使mRNA分子沒有poly(A)尾巴,也能有效地合成cDNA。隨機六聚體引物可以增加cDNA合成的起始點多樣性,從而提高cDNA庫的覆蓋範圍。

在實際套用中,通常同時使用這兩種引物,以便最大限度地從mRNA中合成cDNA。這樣可以確保無論mRNA分子是否有poly(A)尾巴,都能有效地合成cDNA。