最確數法mpn法

MPN(Most Probable Number)法是一種用於估計液體或懸浮液中微生物數量的統計學方法。這種方法基於這樣一個事實:在一定體積的樣品中,微生物的數量很可能是最接近某個特定整數的。MPN法通過一系列的梯度稀釋和培養步驟來確定最可能的微生物數量。

以下是MPN法的步驟:

  1. 樣品稀釋:將樣品進行一系列的梯度稀釋,通常使用無菌水進行稀釋。例如,可以製備10-1、10-2、10-3、10-4等稀釋度的樣品。

  2. 接種培養:對於每個稀釋度,分別取一定量的稀釋液接種到固體培養基上。可以採用多孔平板或試管進行接種。

  3. 培養:將接種的培養基放入適宜的條件(如溫度、pH等)下培養一段時間,以便微生物生長。

  4. 計數:觀察培養基上的菌落數量。對於平板培養,每個菌落代表一個起始的微生物。對於試管培養,如果使用液體培養基,則可以通過濁度來估計微生物的數量。

  5. 計算:根據培養基上的菌落數量和所使用的稀釋度,可以計算出樣品中最初可能含有的微生物數量。最可能的數量(MPN)是那些在至少兩個稀釋度中產生菌落的數量。

MPN法是一種保守的估計方法,因為它假設微生物的數量是最接近整數的。這種方法適用於那些不能或不易通過顯微鏡直接計數的微生物,如細菌、真菌等。MPN法的結果通常給出一個範圍,而不是一個精確的數量。