最小抑菌濃度實驗步驟
最小抑菌濃度(MIC)實驗的步驟如下:
- 準備細胞培養所需的各種試劑和培養基,並進行梯度稀釋。
- 將待測藥物在細菌生長的培養基中做好一系列的濃度梯度,每個孔徑至少有對數期的菌液。一般以0.1%水溶液形式提供藥物。若細菌不能直接生長在抗生素存在的液體培養基,可以先做MIC。
- 將抗生素孔和細菌孔分別放置在適當的讀數範圍內,進行孵育。
- 孵育後,將孔內的液體倒掉,並用PBS清洗細胞2次。
- 使用酶標儀測定各孔的OD值。一般以抗生素孔OD值小於細菌孔OD值為標準抑菌完成。
- 根據藥物濃度梯度,確定最低可以抑制細菌生長的濃度。這對應的濃度就是MIC值。
- 實驗結束後需要清理實驗區域,並確保實驗操作過程中無菌操作。
請注意,實驗過程中需要嚴格遵守實驗室安全規定和操作規程,確保實驗結果的準確性和安全性。